硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（Fluid Thioglycollate Medium）是 Brewer 于1940 年發(fā)明，自20 世紀50 年代起，國內外藥典陸續(xù)將其收錄，用于藥品的無菌檢查。1977 年版《中國藥典》無菌檢查項下，將硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基作為選擇性培養(yǎng)基列入，并注明用于汞砷類化合物的無菌檢查。1985 年版《中國藥典》，硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基收載于無菌檢查項下，培養(yǎng)基的名稱為“需氧、厭氣菌培養(yǎng)基”。在此后的各版《中國藥典》及《中國生物制品規(guī)程》，均收載硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基用于無菌檢查。

雖然硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基存在一定的局限性，其不能使所有的梭狀芽孢桿菌生長，但之所以能夠沿用至今，是因為其具有不可替代的巨大優(yōu)勢。即其能在普通有氧環(huán)境下提供厭氧條件，使需氧菌和厭氧菌均能夠生長良好，并易于觀察結果，這提供了一般實驗室難以達到的厭氧培養(yǎng)條件。
 

成分分析及原理

我們先看一下硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基的配方：

酪胨（胰酶水解）)和L-胱氨酸:是由酪蛋白經(jīng)過胰酶水解后，將大分子的酪蛋白分解為?、胨、肽及多種氨基酸。由于原材料是從奶中提取的酪蛋白，質量穩(wěn)定，氨基酸種類多，優(yōu)于一般的胨，與L-胱氨酸構成細菌成長所需的氮源。

葡萄糖 : 提供微生物生長所需的碳源。自然界中大多數(shù)微生物都能利用葡萄糖，由于細菌代謝過程中分解代謝葡萄糖產(chǎn)酸，培養(yǎng)及加熱滅菌時葡萄糖被破壞會產(chǎn)生有毒物質，因此應注意其用量及加熱次數(shù)。

酵母浸出粉 : 酵母浸出粉是由氨基酸類、肽類、水溶性維生素及酵母多糖、酵母核酸組成的一種混合物。它不僅能補充氮源，還能提供微生物生長的各種維生素及氨基酸。

氯化鈉及酪胨、酵母浸出粉中含有的等無機離子，構成細菌細胞的組織物質，具有影響酶活性及調節(jié)滲透壓的作用。 

硫乙醇酸鈉或硫乙醇酸: 在培養(yǎng)基中的主要作用有兩方面，一是與L-胱氨酸、葡萄糖有降低氧化還原電位的作用，使深部氧化還原電位較低，因而維持培養(yǎng)基下層的厭氧條件，有利于厭氧菌的生長。二是具有鈍化砷和汞類藥物及防腐劑的抑菌作用。當汞鹽等物質存在時，它與培養(yǎng)基中的SH 基結合，抑制了細菌的生長。當培養(yǎng)基中有硫乙醇酸鹽時，培養(yǎng)基內SH 基增多，消除汞鹽等抑菌現(xiàn)象，有利于細菌的生長。

瓊脂 : 在培養(yǎng)基中加入少量瓊脂，可減少液面流動，降低氧的吸收，維持培養(yǎng)基底部的還原電位，有利于厭氧菌的生長。但應選用透明度好的瓊脂，以免影響判斷結果。

刃天青為氧化還原指示劑，新鮮制備的培養(yǎng)基，溫度較高，培養(yǎng)基管的上部與氧接觸，刃天青呈藍色，而中下部培養(yǎng)基呈無氧狀態(tài)，刃天青還原為無色，當培養(yǎng)基放置后，培養(yǎng)基與空氣接觸，有溶氧，刃天青被氧化，變?yōu)榉奂t色。

使用應注意事項

配制硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基時，除按照藥典規(guī)定的方法制作外，還需要注意以下問題：

（1）硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基有0.075 %的瓊脂，在滅菌后，培養(yǎng)基應呈現(xiàn)無渾濁狀態(tài)，如果放置一段時間，出現(xiàn)輕微渾濁，尤其是放入冰箱后，渾濁現(xiàn)象更加明顯。渾濁程度一方面可能與培養(yǎng)基用的瓊脂質量有關，另一方面也可能與滅菌是否徹底有關，具體情況應具體分析。隨著目前無菌檢查對培養(yǎng)基的質量要求越來越高，包括北京三藥在內的國內幾家培養(yǎng)基供應商在這方面的研究有質的突破，不僅澄明度高，氧化層也能維持穩(wěn)定。

（2）如果存在大體積配制，然后分裝到小的容器中的情況，應注意分裝的均一性。

（3）培養(yǎng)基在滅菌后至使用過程中取放應避免搖晃，以免培養(yǎng)基因振動而進入氧氣，影響培養(yǎng)基的使用，接種操作應動作迅速、敏捷。

（4）在接種前，如果氧化層（粉紅色）的高度超過培養(yǎng)基深度的1/3，須經(jīng)100℃水浴加熱至粉紅色消失（不超過20 min），迅速冷卻，只限加熱一次，并防止被污染。

（5）硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基含有較多的還原性物質，在滅菌過程中，應注意在無菌保證的前提下，避免過熱，以防止PH降低到6.9以下的可能。

（6）供試品加入到硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基中之后，可能出現(xiàn)瓊脂析出的情況，這個應根據(jù)調查情況具體分析，并采取有效措施。
原文鏈接：https://mp.weixin.qq.com/s/LXlRQcZnpuxu_CWLNSvjJg